Histologia tema 1 (2017)

Apunte Español
Universidad Universidad Autónoma de Barcelona (UAB)
Grado Biología - 1º curso
Asignatura Histologia
Profesor A.S.
Año del apunte 2017
Páginas 3
Fecha de subida 21/10/2017
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HISTOLOGIA         Grau  Biologia         Carme  Blanco  Gavaldà     9/2/17     TEMA 1:   •   Etimología:  histo  =  tejido  /  logía=  conocimiento  à  estudio  de  los  tejidos     •   TEJIDO:  grupo  de  células  (unidad  básica  estructural)  organizadas  para  realizar  una  función   específica.  Hace  falta  cooperación      -­uniones  intercelulares            -­ambiente  adecuado     •   COMPONENTES  DE  UN  TEJIDO:   1.   CÉLULAS  (componente  vivo)   2.   SUSTANCIA  INTERCELULAR  (inerte,  parte  no  viva,  derivada  de  las  células)   o   Sustancia   amorfa:   sin   forma,   fundamental,   producida   por   las   propias   células.   o   Porción  con  forma:  proteínas  asociadas  formando  fibras.   3.   LÍQUIDO  TISULAR:  baña  todo  el  contenido  y  nutre  todas  las  células.     •   DE  DONDE  PROCEDEN  LOS  TEJIDOS?   El  zigoto  se  divide  (blastocito,  blástula…)  En  el  estadio  de  gástrula  se  forman  3  invaginaciones,  que   son  los  3  primeros  tejidos  iniciales,  que  originaran  el  resto.     1)ECTODERMO   -­PIEL:  epidermis  epitelial,  dermis  e  hipodermis  +  anejos  (piel,  uñas,  glándulas)   -­TEJIDO   NERVIOSO:   neuronas   y   glía   (excepto   microglia,   función   de   defensa,   como   macrófagos  del  sistema  nervioso)     -­  GERMINALES   -­ALGUNOS  EPITELIOS     2)MESODERMO   -­CONJUNTIVO  y  derivados:  óseo,  cartilaginoso,  adiposo  y  sanguíneo.   -­MUSCULAR:   excepto   iris   (ectodermo,   enfoca   cuando   abrimos   y   cerramos   la   pupila)   y   lengua  (endodermo)   -­ALGUNOS  EPITELIOS       3)ENDODERMO       -­MUSCULOS  DE  LA  LENGUA   -­ALGUNOS  EPITELIOS  (GLANDULAS:  tiroides,  páncreas…)   •   TÉCNICA  HISTOLÓGICA.   1-­  PREPARACION  DE  TEJIDOS  PARA  SU  ESTUDIO  EN  EL  MICROSCOPIO:    la  luz  tiene  que   travesar  el  tejido,  por  eso  hacen  falta  secciones  muy  finas  y  contrastada  del  órgano  o  tejido,  hace   falta  procesarlo.   1)Fijación:  en  función  de  la  técnica  utilizadas  después.  El  objetivo  es  que  no  se  degrade  la   muestra,  hay  que  preservarla,  evitar  su  descomposición  (por  autolisis  de  enzimas  o  acción   de  bacterias).   o   FÍSICA:   CALOR/   CONGELACIÓN   -­>   desventaja:   es   reversible,   puede   volver   a   descomponerse.     o   QUÍMICA:  irreversible,  pero  cambia  estructura  del  tejido,  alteración  química.   §   Formaldehido  (óptico)     §   Gluteralderhido   (m.   Electrónico),   endurece   más   =   cortes   más   finos   (-­   de   1   micra)   -­>  normalmente  se  mezclan  porque  hay  algunos  que  penetran  más  pero  son  de  acción  lenta   y  otros  que  penetran  poco  pero  son  de  acción  rápida.  Soluciones  fijadoras:     BOUIN  (mezcla  3,  para  teñir  muestras)     PLP  (lisina,  parafomarmaldehido  y  periodato)   2)  Inclusión:  endurecer  más  el  tejido  para  hacer  cortes  más  finos  (solidificar  secciones)     PARAFINA  (óptico)     RESINAS  (m.  electrónico)     Pasos:  1-­poner  en  un  molde  de  plástico  o  metal       2-­infiltracion  para  deshidratar:  sacar  el  agua  y  substituir  por  parafina       3-­  rellenar  con  parafina  líquida  y  dejar  enfriar       4-­  obtenemos  un  bloque.   3)  Microtomía:  cortar,  maquinas  adaptadas  según  el  procesado/fijación  de  la  muestra     à  MICRÓTOMO  DE  ROTACIÓN:  instrumento  de  precisión,  consta  de  un  portabloques  con   el  tejido  en  su  interior,  unos  tronillos  para  ayudar,  un  sistema  de  rotación  para  fijar  las  micras   que  se  avanzara  cada  vuelta,  una  cuchilla  de  acero  y  una  palanca.     -­entre  3  y  5  micras   -­colocar  muestra,  bajar  palanca,  cortar,  gira  la  rueda,  y  a  la  siguiente  vuelta  avanza  el   doble.   -­con  el  calor  del  choque  se  derrite  la  parafina,  por  eso  quedan  pegadas  y  obtenemos   una  serie  de  muestras.     àCRIOSTATO:  para  muestras  congeladas,  cortar  dentro  de  una  cámara  a  -­25ºC.  Uso:   §   Tejido   nervioso   (delicado,   cale   conservar   la   estructura   molecular,   con   inmunohistoquímica)   §   Diagnostico  rápido  (en  operaciones  puede  aparecer  un  bulto…)   -­hasta  15  micras.     à  VIBRATOMO:  para  tejidos  no  incluidos,  no  endurecidos  (no  parafina  ni  resinas),  frescos   o  fijados.  No  podemos  obtener  una  loncha  fina,  corta  como  sierra,  en  cizalla,  zig-­zag.     -­Entre  25  y  40  micras.       (ventaja:  mejor  conservado  porque  no  se  utilizan  solventes  ni  parafinas/  desventaja  cortes  gruesos)     4)Baño  con  agua  caliente  a  37º  para  desplegar  el  tejido,  que  se  a  doblado  con  el  calor.   5)   Pegar   a   láminas   de   vidrio,   los   portaobjetos,   tratados   con   albumina   o   poli-­L-­lisina   para   facilitar  la  adherencia  al  porta.   6)  En  estufa  a  37º,  con  los  portas  en  una  gradilla,  para  aumentar  la  adherencia.     2-­   CONTRASTAR   EL   TEJIDO:   los   órganos   desvían   de   forma   parecida   la   luz,   no   los   podemos   distinguir,  hace  falta  contrastar  para  diferenciar  las  estructuras.   1)TINCIÓN  TOPOGRÀFICA:  basado  en  una  reacción  química  entre  sustancias  de  tinción  y   el  tejido.  Uso  de  COLORANTES  à  reacción  electroestática.     +/catiónicos/básicos    -­>  unión  a  estructuras  de  carga  negativa,  ácidos.     -­/anionicos/ácidos   §   Hematoxilina  +  eosina:  juntas  se  utilizan  para  detectar  patologías.   HEMATOXILINA  (básica)  actúa  sobre  NUCLEO  (DNA  ácido)  /  RIBOSOMAS  (RNA)  /   NUCLEOLO  /  RER   EOSINA   (ácida)   actúa   sobre   CITOPLASMA,   que   es   homogéneo,   con   proteínas   básicas.   (entreocitos   del   epitelio   intestinal   con   microvellosidades,   tienen   glucocalix   con   azucares  básicos,  actúa  hematoxilina)   §   GIEMSA,  teñir  la  sangre  (glóbulos  blancos  con  núcleo=  morado  /  eritrocitos  sin  núcleo   =  rosa)   §   TRICROMICOS:  mezcla  2  ácidos  y  1  básico   -­citoplasma=  rosa   -­núcleo=  morado   -­colágeno/  tejido  conjuntivo  denso     2)HISTOQUÍMICA:   más   concreto,   no   actúa   sobre   estructuras,   sino   que   sobre   enzimas   y   moléculas.   §   PAS:  ácido  periódico  +  Schiff    para  detectar  azúcares.   -­Oxida  grupos  hidroxilo,  los  rompe,  y  forma  grupos  aldehído  que  reaccionan  con   el  reactivo  de  Schiff  dando  un  color  MORADO.   §   SUGAN  NEGRO  o  4:  para  detectar  lípidos,  color  ANARANJADO.   -­   para   teñir   el   tejido   adiposo,   necesitamos   un   colorante   no   acuoso,   hidrófobo   y   liposoluble.   -­hace  falta  que  los  lípidos  estén  en  el  tejido,  por  eso  no  podemos  utilizar  muestras   incluidas  en  parafina,  porque  los  alcoholes  disuelven  los  lípidos,  cale  preservar  en   frio,  congelar  y  cortar  con  criostato.     3)INMUNOHISTOQUÍMICA:  reacción  antígeno-­  anticuerpo.     §   INMUNOFLUORESCENCIA:  Detección  de  antígenos  específicos  en  la  superficie   utilizando   ANTICUERPOS   marcados   con   FLUOROCROMOS,   que   emiten   fluorescencia  (neuronas  y  retina,  cuerpos  y  bastones  en  verde).   §   A   ENZIMAS:   añadir   substrato   concreto   de   la   enzima   para   que   se   unan   (EJ:   peroxidasa,  añado  agua  oxigenada  y  da  el  color)     3-­  OBSERVACIÓN  A  MICROSCOPIO:   o   M.  ÓPTICO:  utiliza  los  fotones  de  la  luz  visible.   -­consta  de  una  base,  una  columna  y  un  sistema  de  lentes:     -­LUPA:  el  más  simple,  1  lente  con  2  oculares.     -­COMPUESTO/COMPLEJO:  tiene  más  de  1  sistema  de  lentes.   -­la  fuente  de  luz  situada  bajo  el  condensador,  que  al  pasar  por  el  orificio  de  este   ilumina  el  tejido  que  esta  sobre  la  platina,  en  el  porta.     -­con  el  macrométrico  y  el  micrométrico  se  puede  mover  y  enfocar.   o   M.  ELECTRÓNICO:  utiliza  un  haz  de  electrones.     LIMITE  DE  RESOLUCIÓN  de  la  vista  humana  es  de  0,1  mm.   -­podemos  diferenciar  2  puntos  separados  como  independientes  a  un  máximo  de  0,1mm.  A   más,  los  vemos  juntos,  como  un  único  punto.   ...

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